ELISPOT (Enzyme-linked immunosorbent spot) анализ был разработан Cecil Czerkinsky в 1983 г. как метод мониторинга иммунных ответов у человека и животных.

ELISPOT в основе своей является модификацией метода ИФА и исходно предназначался для количественного определения В-лимфоцитов, секретирующих специфические антитела. В дальнейшем этот анализ был адаптирован к различным задачам, и, прежде всего, к идентификации и количественному определению клеток, вырабатывающих цитокины. ELISPOT позволяет визуализировать секретируемый продукт на поверхности активированной или стимулированной к иммунному ответу индивидуальной клетки. Т.о. ELISPOT дает и качественную (тип иммунного белка), и количественную (число отвечающих клеток) информацию.

Благодаря уникально высокой чувствительности ELISPOT анализа, идентификация малочисленных клеточных популяций (при антиген-специфичных ответах), которая была недоступна ранее, теперь стала относительно простой задачей. Такая уникально высокая чувствительность, во многом, определяется тем, что детектируемый продукт в момент анализа находится на поверхности секретирующей клетки, будучи связан с ее рецепторами, до того, как он растворится в супернатанте или деградирует. Это делает ELISPOT анализ значительно более чувствительным, чем ИФА. Пределы его чувствительности ниже 1/100 000, что делает этот метод очень полезным для мониторинга антиген-специфичных ответов в различных областях иммунологических исследований, включая исследования рака, пересадку органов, инфекционные заболевания и разработку вакцин. В последнее время этот метод завоевывает все большую популярность.

Хотя как метод анализа ELISPOT существует уже более 20 лет, он все еще претерпевает значительные изменения и усовершенствования. Современный ELISPOT анализ проводят с использованием  ELISPOT-ридеров, которые обладают компьютерными возможностями визуализации активно продуцирующих клеток. Это позволяет максимально автоматизировать анализ и обеспечить более высокую его точность, в сравнении с ручным просмотром.

Литература:

Czerkinsky, C., Nilsson, L-A., Nygren, H., Ouchterlony, O., and Tarkowski, A. 1983. A solid phase enzyme-linked immunospot (ELISPOT) assay for the enumeration of specific antibody-secreting cells. J. Immunol. Methods 65:109.

ELISPOT-ридеры от компании CTL

Анализаторы ImmunoSpot® производятся в трех модификациях, разработанных под разные задачи пользователей и под разные бюджеты. Каждая из трех моделей может быть приспособлена под специфические цели научных исследований или для клинических и биотехнологических анализов.

ELISPOT readerS4 Core Analyzer
Наиболее совершенная модель, которую можно использовать для любых

видов ELISPOT анализа, соответствует GLP

ELISPOT reader proS4 Pro Analyzer
Прибор для широкого спектра задач, соответствует GLP

S4 UV Analyzer
Прибор для ELISPOT и FluoroSpot анализа